题目内容
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[单选题]
正确的PCR反应过程应为（）。
A.延伸—退火—变性
B.变性—退火—延伸
C.退火—延伸—变性
D.退火—变性—延伸
E.变性—延伸—退火
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B、根据SNP位点设计特异引物,其中一条链(特异链)的3′末端与SNP位点的碱基互补(或相同),另一条链(普通链)按常规方法进行设计,因此,AS-PCR技术是一种基于SNP的PCR标记。因为特异引物在一种基因型中有扩增产物,在另一种基因型中没有扩增产物,用凝胶电泳就能够很容易地分辨出扩增产物的有无,从而确定基因型的SNP
C、杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法,在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG,与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时,通过确定荧光强度最强的探针位置,获得一组序列完全互补的探针序列
D、是将变性的单链PCR产物通过与硅芯片上的化合物共价结合后,在硅芯片上进行引物的退火,延伸反应,突变部位配对的碱基与正常配对的碱基不相同。根据引物在延伸反应中所结合的不同碱基的不同质量在质谱仪上显示不同峰而检测SNP
E、目标核酸片段PCR扩增,部分加热变性后,含有突变碱基的DNA序列由于错配碱基与正常碱基不能配对而形成异源双链。因包含错配碱基的杂合异源双链区比完全配对的同源配对区和固定相的亲和力弱,更易被从分离柱上洗脱下来,从而达到分离的目的。SNPs的有无最终表现为色谱峰的峰形或数目差异,依据此现象可很容易从色谱图中判断出突变的碱基
A.也被称为多重引物PCR或复合PCR
B.是在同一PCR反应体系里加入两对或两对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应
C.其反应原理、反应试剂和操作过程与一般PCR完全不同
D.美国科学家JSChamberlain在Duchenne型肌营养不良基因座缺失的研究中首次引用了多重PCR的概念
E.多重PCR技术已被广泛应用于核酸诊断的各个领域，包括基因敲除分析、突变和多态性分析、定量分析及RNA检测
